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目的高效建立高效液相色谱法同时测定奶味饮料中的香兰素和乙基香兰素的检测方法。方法样品经含5%乙酸的液相乙腈溶液提取液提取,超声处理后,使用乙腈定容,高速离心后上清液过0.22μm微孔滤膜。使用高效液相色谱检测,色谱时测检测波长308 nm,外标法定量。结果本方法前处理简便易操作,法同香兰素和乙基香兰素在0.1~100μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,以3 S/N作为最低检出限,方法的检出限均为0.02μg/mL,加标回收率分别为97.0%~101.1%、96.0%~100.5%,定奶的香相对标准偏差小于5%。结论该方法操作简便,味饮准确度高,重现性好,适合奶味饮料中的香兰素和乙基香兰素的快速测定。

1引言

香兰素和乙基香兰素作为食品用香料类的料中兰素兰素食品添加剂,由于能够极大的增强饮料的奶香气息,在奶味饮料中的应用非常广泛。但香兰素和乙基香兰素的和乙大量摄入会导致头晕、恶心、基香呕吐、高效呼吸困难等反应,液相甚至对人体的肝、肾等代谢器官带来极大损伤。色谱时测

目前常见的法同香兰素和乙基香兰素的检测方法有紫外分光光度法、气相色谱法、定奶的香液相色谱法、味饮液相色谱-质谱联用法等。分光光度法进行联合检测时无法将两者区分,存在相互的干扰,在食品检测中应用较少;气相色谱法前处理周期长,容易造成被测物在空气中的氧化,因而容易带来精密度差的问题;液相色谱法操作简单,精密度高,重复性好,但目前多应用于婴幼儿乳粉和乳制品中,在奶味饮料中应用不多,而且存在着前处理繁琐的问题;液相色谱-质谱联用法对设备要求较高,操作繁琐,在基层检验机构中推广困难。

奶味饮料,尤其是奶茶近些年在年轻人群体中日渐风靡,其中也不乏有一些不良商家过度添加香兰素和乙基香兰素作为奶味增加剂,增加饮料的口感,极大的危害了人民的健康。建立一种简便的香兰素和乙基香兰素的快速联合检测方法,能够及时的获得奶味饮料中的奶味添加剂含量,对于奶茶行业的监督、指导和规范具有重要意义。

本研究建立了一种利用高效液相色谱法同时测定奶味饮料中的香兰素和乙基香兰素的方法,以期对奶味饮料中的香兰素和乙基香兰素的检测和监管提供了一种简便有效的方式。

2材料与方法

2.1仪器与试剂

Agilent 1260型高效液相色谱仪(配DAD检测器)、Ultrasonic Cleaner超声波发生器、TB-215D分析天平[丹佛仪器(北京)有限公司];TG16WS高速离心机(长沙湘智离心机仪器有限公司)。

香兰素(纯度≥99.0%)、乙基香兰素(纯度≥98.0%)(上海麦克林生化科技有限公司)。

乙腈、甲醇(色谱纯)、乙酸、甲酸、正己烷、乙酸铵(分析纯,国药集团化学试剂有限公司);0.22μm有机滤膜(天津津滕有限公司);实验室用水超纯水。

无添加纯牛奶、养乐多、奶昔、多种口味奶茶均为市售。

2.2实验方法

2.2.1溶液配制

混合标准储备溶液配制:分别准确称取500 mg的香兰素和乙基香兰素于100 mL的容量瓶中使用含有5%乙酸的乙腈溶液溶解,定容,配制成分别含有香兰素和乙基香兰素均为5 mg/mL标准贮备液,避光,4℃保存。

混合标准中间液配制:精确量取2 mL香兰素和乙基香兰素标准储备溶液于100 mL的容量瓶中使用含有5%乙酸的乙腈溶液定容,配制成分别含有香兰素和乙基香兰素均为100μg/mL混合标准中间溶液,避光,4℃保存。

混合标准工作液的配制:分别量取适量的混合标准中间液,使用含有5%乙酸的乙腈溶液配制成含有0.1、0.2、0.5、1.0、5.0、10、20、50、100μg/mL香兰素和乙基香兰素的系列标准工作液。

2.2.2样品前处理

准确量取2 mL的奶味饮料,置于10 mL的离心管中,加入2 mL 5%乙酸的乙腈溶液,充分振摇,超声处理5 min,使用乙腈定容后,将溶液充分振荡均匀后,10000 r/min离心10 min。取上清,过0.22μm有机滤膜后,供高效液相色谱测定。

2.2.3液相色谱条件

色谱柱:SB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);柱温:30℃;流量:1.0 mL/min;流动相:乙腈+水+甲醇+乙酸+甲酸+乙酸铵=100 mL+600 mL+300 mL+12.5 mL+0.4 mL+0.6 g;检测波长:308 nm;进样量:10μL;以色谱峰的保留时间定性,采用外标法峰面积定量。

声明：本文所用图片、文字来源《食品安全质量检测学报》2020年9月，版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系

相关链接：香兰素，乙基香兰素，液相色谱仪，乙腈溶液

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