为了抑制霉菌的分散生长

食品安全问题近年来一直是分散关乎民生的重大议题，人们往往更关心食品中的固相高效有害物质种类和含量，而忽视了由食品包装材料迁移的结合有害物质成分和迁移量。纸包装是液相一类常见的重要食品包装材料。纸张在潮湿温热的色谱环境中易生长霉菌。为了抑制霉菌的分散生长，生产企业会采用喷淋、固相高效施胶、结合涂覆及浸渍等相关工艺，液相将具备抗荫特性的色谱如稳定性好的季铵盐添加到样品纸张中，增强纸张的分散抗菌性能。此外，固相高效在木材防腐的结合过程中也会使用到季铵盐类的防腐剂，这部分季铵盐也可能污染食品接触用纸。液相季铵盐对水生生物具有较强的色谱毒性，且可以引起人类的哮喘，皮肤过敏性反应和视力减退等病症，其中苯扎氯铵可以诱导人类肺上皮细胞凋亡。欧洲食品安全局规定季铵盐在食品中残留的上限为0.1mg/kg。由食品包装迁移的季铵盐抑菌剂风险不容小觑。

目前对于季铵盐类抑菌剂的检测方法主要有紫外-可见分光光度法、毛细管电泳法、液相色谱法、气相色谱/质谱法和高效液相色谱-质谱/质谱法等，测试领域涉及食品、水样、土壤和沉积物等，而目前并没有关于食品接触用纸中季铵盐抑菌剂分析方法的相关研究。高效液相色谱-串联质谱法相比其他方法具有快速、高效、灵敏等优点，是对季铵盐类抑菌剂定性定量的有效技术。目前关于季铵盐类抑菌剂的研究中所涉及的前处理方法主要有液液萃取、固相萃取，并通常需要氮吹、旋蒸等繁琐的操作。基于此，本研究采用了操作简便的分散同相萃取技术，结合高效液相色谱串联质谱法建立了食品接触用纸中四甲基氯化铵、十二烷基二甲基苄基溴化铵、十二烷基三甲基氯化铵、十四烷基二甲基苄基氯化铵、十六烷基二甲基苄基氯化铵和双十烷基二甲基氯化铵6种季铵盐类抑菌剂的准确、快速分析方法。

1材料与方法

1.1材料与仪器

实验中使用的各食品接触用纸样品包括茶叶包装纸2种、糖果包装纸2种、汉堡包装纸3种、手抓饼包装纸2种、糕点包装纸1种、牛奶包装盒8种从市场自行采集；四甲基氯化铵(tetramethylammoniumchloride，TAC)(纯度≥97％)、十二烷基二甲基苄基溴化铵(benzvldodecvldimethvlammoniumbromide，BDAB)(纯度≥98％)、十二烷基三甲基氯化铵(dodecvltrimethvlammoniumchloride，DTAC)(纯度≥98％)、十四烷基二甲基苄基氯化铵(tetradecyldimetllvlbenzvlammoniumchloride，TDBAC)(纯度≥98％)、十六烷基二甲基苄基氯化铵(benzyldimethylhexadecylammoniumchlorme，BDHAC)(纯度≥97％)、双十烷基二甲基氯化铵(didecyldimethylammonjumchloric1e，DDAC)(纯度≥98％)上海安谱实验科技股份有限公司；N-阿基乙二胺(PSA)、实验科技股份有限公司；N-阿基乙二胺(PSA)、BmunleeSPPC18、石墨化碳黑(graphiLizingofcaIlbon1)lack，CCB)安捷伦技术有限公司；甲醇、乙醇、乙酸铵、乙腈色谱纯，美国默克公司。PerkinElmerQsightLX50超高效液相色谱、PerkinE1merQsight系列三重四级杆质谱装配电喷雾离子源(electrosprayionization，ESI)美国铂金埃尔默公司；M洲-Q超纯水仪美国Millipore-Q公司；Vortex3自动漩涡混合器德国IKA公司；高速冷冻离心机STl6RThennos公司；调速振荡器HY-2A江苏会坛荣华仪器制造有限公司。

1.2实验方法

1.2.1仪器条件

1.2.1.1色谱条件

BrownleeSPPC18柱(2.1mm×50mm，1.7μm)。梯度淋洗：A-5mmol/L乙酸铵水溶液，B-5mmol/L乙酸铵甲醇溶液；0.00～0.50min，30％A；0.50～3.00min，30％～10％A；2.00～4.00min，10％～2％A；4.00～6.50min，2％～0A；6.50～6.60min，0～30％A；6.60～7.00min30％A；柱温箱温度：40℃。

1.2.1.2质谱条件

PerkinElmerQsight系列三重四级杆质谱装配EST电离源，采用正源模式；离子化电压4000V；离子源温度350℃；反吹干燥气100μL/min；雾化气180μL/min；人口电压、碰撞能量、特征离子对见表1；所用气体均为高纯氮。

1.2.2标准溶液配制

使刚分析天平(精度0.0001g)分另准确称取TAC、BDAB、DTAC、TDBAC、BDHAC和DDAC标准品0.01g用50％甲醇水溶液(体积比：1:1)溶解并定容至10μL/mL容量瓶中，配制成1000μg/mL的各标准储备溶液；取上述6种标准储备液各100μL，用50％甲醇水溶液稀释定容至10mL容量瓶中，配制成1μg/mL混合标准储备液；上述所有标准储备液均置于-20℃冰箱中保存。实验中其他标准工作液均用50％甲醇水溶液将混合标准储备溶液稀释成所需不同浓度以备使用。

1.2.3样品前处理方法

将干燥的食品接触用纸剪成小于O.5cm×0.5cm的碎片，准确称取1.0g食品接触用纸于50mL锥形瓶中，用移液枪加入10mL甲醇，超声提取3min后12000r/min离心5min，准确抽取1mL有机层转移至事先装有75mgPSA净化剂的离心管中，高速挡涡旋2min后8000r/min离心3min，抽取上清液过0.22μm滤膜，等待仪器检测。

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