(十)克勒克酵母属(Kloechera) 细胞柠檬形、酵母卵形至长椭圆形或细长形。鉴定无性繁殖为两极出芽,酵母假菌丝有或无。鉴定能发酵糖,酵母不同化氮源。鉴定广泛存在于水果,酵母可能污染果汁,鉴定可使酒失去香味并混浊。酵母 (十一)丝孢酵母属(Trichosporon) 出芽细胞各种形态,鉴定假菌丝发达,酵母有真菌丝,鉴定经常有节孢子,酵母通常较丰富。鉴定在液体培养基上形成菌醭。酵母不产生子囊孢子、掷孢子和节孢子。可形成无性的内生孢子。 三、培养基 (一)麦芽汁液体培养基 成分:15波林麦芽汁,pH5.4。 制法:分装小管,每管约3mL,1150C 15min灭菌。 (二)麦芽汁固体培养基 成分:10波林麦芽汁,琼脂2%。 制法:分装小管,1150C 15min灭菌,放置斜面。 (三)麦氏培养基 成分:葡萄糖0.10%,氯化钾0.18%,酵母汁0.25%,乙酸钠0.82%,琼脂1.5%。 制法:用蒸馏水配制,分装小管,1150C 15min灭菌,放置斜面。 (四)克氏培养基 成分:磷酸二氢钾0.012%,磷酸氢二钾0.02%,乙酸钠0.5%,葡萄糖0.062%,氯化钠0.062%,蛋白胨0.25%,水洗琼脂2%,生物素(biotin)2.0μg/100mL,混合盐类1mL(每100mL,培养基中含量)。 制法:培养基用蒸馏水配制,pH6.9~7.1,分装小管,1150C 30min灭菌,放置斜面。 (五)葡萄糖-酵母汁-蛋白胨液体培养基 成分:葡萄糖20g,蛋白胨10g,酵母汁5g,蒸馏水1000mL。 制法:将上述成分溶解于蒸馏水中,1160C 15min灭菌。 (六)葡萄糖-酵母汁-蛋白胨琼脂培养基 成分:葡萄糖20g,蛋白胨10g,酵母汁5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。 制法:将上述成分溶解于蒸馏水中,分装小试管,1160C 15min灭菌,放置斜面。 (七)马铃薯琼脂培养基 成分:马铃薯100g,葡萄糖20g,琼脂20g,自来水1000mL。 制法:将100 g洗净去皮的马铃薯擦成丝状,浸于300mL自来水中,冷浸后取230mL加770mL水,总体积为1000mL,加葡萄糖和琼脂,溶化过滤,装大管各20mL,1150C 15min灭菌。 (八)玉米粉琼脂培养基 成分:黄玉米粉12.5g,琼脂3.8g,水300mL。 制法:将玉米粉搅匀于300 mL水中,以60℃热水浴保温1h,用滤纸过滤,滤液加水至300mL,加琼脂,121℃15min灭菌,趁热用脱脂棉过滤,装大管各20mL,1150C 15min灭菌。 (九)酵母发酵培养基 1、各种糖液:以纸谱纯的葡萄糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、棉子糖、蜜二糖等糖类,预先用无菌蒸馏水分别配制成10}6溶液,煮沸15min备用。 2、发酵用含糖培养基:取12.5%豆芽汁或0.6%酵母粉浸汁1.2mL,加入小管内,再放入一小套管(倒置),1150C 30min灭菌后,加入无菌的10%糖液0.3mL,放置一个时期,使小管内外糖液尽可能扩散均匀,然后接种。 3、12.5%豆芽汁:黄豆芽125 g加水1L,煮沸30min,过滤加水到1L,1150C 30min灭菌,备用。 4、0.6%酵母粉浸汁:加60g干酵母粉于1L水中,必要时加一些蛋清以澄清滤液,1210C:灭菌15min,趁热用双层滤纸过滤,再以115℃30min灭菌,备用。 (十)酵母同化碳源培养基 成分:硫酸铵0.5%,磷酸二氢钾O.1%,硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.05%,氯化钙(CaC12·2H2O)0.01%,氯化钠0.01%,糖或其他碳源O.5%,酵母膏(也可用豆芽汁代替)O.02%。 制法:用蒸馏水配制,培养基过滤后装小试管,每管约2~3mL,1150C 15min灭菌。 (十一)酵母同化乙醇基础培养基 成分:硫酸铵O.1%,磷酸二氢钾 O.1%,硫酸镁(MgSO4·7H2O)O.05%,酵母膏O.01%。 制法:用蒸馏水配制,过滤后每小管定量装5mL,1150C 15min灭菌,临用时加3%乙醇(用99%乙醇O.15mL)。 (十二)酵母同化氮源基础培养基 成分:葡萄糖2%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁(MgSO4·7H2O)0.05%,酵母膏0.02%,水洗琼脂2%。 注:酵母膏也可 20%豆芽汁代替,加入量为O.2%。 制法:用蒸馏水配制,过滤,装大试管,每管20mL,1150C 15min灭菌。 (十三)杨梅苷培养基 成分:杨梅苷0.5%,水洗琼脂2%,10%豆芽汁100mL。 制法:上述成分溶化后装小试管,1150C。15 min灭菌,使用前临时再溶化,于各管加1滴10%三氯化铁(FeCl3,用无菌水配),放置斜面。 参考资料:食品卫生微生物检验标准手册 相关链接:马铃薯琼脂培养基,麦芽汁固体培养基,克氏培养基 |
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