不同表明样品在24 h内稳定

2.3.6 稳定性实验
称取样品粉末1.0 g,不同按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液,树脂数鸡室温放置,环纹分别于0、血藤析和2、药材4、质量6、不同8、树脂数鸡13、环纹24 h进样测定,血藤析和结果显示染料木素、药材芒柄花素的质量RSD分别为1.02%、0.86%,不同表明样品在24 h内稳定。树脂数鸡
2.3.7 重复性试验
精密称取同一样品6份,环纹每份1.0 g,按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液,结果显示染料木素、芒柄花素的RSD分别为1.61%、0.76%,表明本方法重复性良好。
2.3.8 加样回收率实验
取已知含量的样品粉末6份,每份0.5 g,精密称定,分别加入染料木素、芒柄花素的对照品0.012 mg,按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液进行测定。结果详见表4。
2.3.9 样品中芒柄花素、染料木素的含量测定
取样品鸡血藤粉末1 g,精密称定,每批药材平行3份,按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液并测定,计算含量。结果见表3及图2。
由表3和图2可看出,除了从化居群1、2和4环样品,其他样品的醇溶性浸出物含量均能达到《中国药典》的规定(不低于8%)。梅州和从化居群的醇溶性浸出物都在3环达到峰值,变化趋势在4环之前基本一致,4环之后含量变化趋势不一致;惠州居群由于采样的限制,只采集到3、4、7、8和9环的样品,采样的环数不连续,故无法从1环开始分析其结果,但可看出3环到4环呈增加的趋势,7环以上的样品中醇溶性浸出物的含量基本保持稳定。同一植株具有不同的树脂环纹数的原儿茶酸含量差异较大,且不同居群样品中的变化趋势不一致。鸡血藤中儿茶素与表儿茶素的含量较高,不同树脂环纹数药材中的含量变化较为明显,二者的变化趋势基本一致,但不同居群样品中的变化趋势则不相同。芒柄花素与染料木素的含量变化差异较小,且具有较为一致的变化趋势(先下降再上升,幅度较小),二者的含量在不同居群来源样品中的变化趋势亦较为一致。
2.4 相关性分析
采用SPSS对环纹数与醇溶性浸出物及5个化学组分含量的数据进行正态性检验,由于芒柄花素数据不符合正态分布,故采用Spearman双变量相关性分析,相关系数见表5。
由表5可知,环纹数与醇溶性浸出物及5个化学成分的相关性均不显著。其中醇溶性浸出物含量与染料木素含量具有显著相关性,与芒柄花素含量具有极显著相关性;表儿茶素含量与儿茶素含量具有非常显著相关性,与芒柄花素具有显著相关性;染料木素与芒柄花素具有非常显著相关性。
结合含量测定结果与实地调查综合分析发现,鸡血藤环纹数与醇溶性浸出物及5个化学成分均无显著相关性,3环以上的树脂环中,芒柄花素、染料木素在植株中变化较小,而儿茶素、表儿茶素、醇溶性浸出物均较高,故3个树脂环以上的鸡血藤质量较好。
2.5 同一条藤茎不同树脂环纹数部位的鸡血藤HPLC指纹图谱研究
2.5.1 色谱条件
乙腈(A)~0.1%醋酸水溶液(B),梯度洗脱:0~25 min,10%~15%A;25~55 min,15%~25%A;55~95 min,25%~45%A;95~120 min,45%~70%A;120~130 min,70%~90%A;130~140 min,90%~100%A。柱温:25℃;进样量:10μL;流速:1 m L·min-1;运行时间140 min;检测波长:260 nm。
2.5.2 对照品溶液的制备
精密称取对照品原儿茶酸2.99 mg,芒柄花素2.10 mg,大豆苷元2.25 mg,儿茶素2.24 mg,染料木素2.46 mg,毛蕊异黄酮2.68 mg,表儿茶素2.37 mg,异甘草素1.09 mg,分别用甲醇定容于5 m L量瓶中,摇匀,作为贮备液。分别取原儿茶酸、芒柄花素、大豆苷元、儿茶素、染料木素、毛蕊异黄酮、表儿茶素及异甘草素对照品贮备液0.5 m L置10 m L量瓶中混合,用甲醇定容,摇匀,作为混合对照品溶液。对照品色谱图见图4。
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